DARPins (Designed Ankyrin Repeat Proteins) sind kleine (14–18 kDa), sehr stabile Proteine. Bestimmte Positionen können randomisiert werden, um mithilfe einer Kombination von In-vitro-Selektionsverfahren (Ribosomen-Display und Phagen-Display) hochaffine Binder gegen gefaltete Proteindomänen oder Proteine zu erzeugen. Da DARPins keine Disulfidbrücken besitzen, können sie für intrazelluläre Anwendungen eingesetzt werden, beispielsweise als hochselektive, hochaffine Binder oder, fusioniert mit E3-Ligasen, als Bio-PROTACs. Neben DARPin-Bibliotheken verfügen wir auch über Sybody-Bibliotheken (Nanobodies).
Wir führen Selektionsexperimente mit DARPins und Sybodies durch, um hochaffine Binder zu erzeugen.
Technische Spezifikationen
Herstellung von DARPins/Sybodies:
- Durchführung eines Ribosomen-Displays mit DARPin-Bibliotheken mit unterschiedlicher Anzahl helikaler Module (1, 2 oder 3), gefolgt von zwei Runden Phagen-Display
- Durchführung eines Ribosomen-Displays mit Sybody-Bibliotheken (mit kurzen, mittleren oder langen Schleifen), gefolgt von zwei Runden Phagen-Display
Verantwortlich: Prof. Volker Dötsch, Dr. Katharina Holzhüter